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      歡迎進(jìn)入上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司！
      
        
    
      
  
      
  
       
  
  
       
  






      


      
  
       
    
      


    
      
    
      
        	 
      
        	     	
      技術(shù)文章
      
          
      首頁 > 技術(shù)文章 > Ludger Tag聚糖的全甲基化
      
          
      
			        
      
       	  
      Ludger Tag聚糖的全甲基化
      
           
      
  　更新時(shí)間：2021-11-23　點(diǎn)擊量：1765
         
      
          
      
          

      Ludger Tag 聚糖的全甲基化
      MALDI-MS 分析聚糖可提供質(zhì)量組成數(shù)據(jù)，并且比 UHPLC 技術(shù)更快（平均一個(gè)樣品只需 1 分鐘的數(shù)據(jù)采集時(shí)間），但唾液酸化聚糖通常更難分析，因?yàn)橥僖核岵糠植环€(wěn)定. 全甲基化是用于 MALDI-MS 檢測的碳水化合物衍生化的流行技術(shù)，因?yàn)樗岣吡穗婋x效率，穩(wěn)定了唾液酸并有助于連鎖分析研究。然而，用于全甲基化的傳統(tǒng)技術(shù)速度慢、勞動(dòng)強(qiáng)度大，因此不適合高通量樣品分析。
      我們開發(fā)了一種簡單易用的 LudgerTag 試劑盒，用于全甲基化聚糖，LT-PERMET-VP96。該套件可用于使用手動(dòng)方法或適用于液體處理機(jī)器人的自動(dòng)方法處理 1-96 個(gè)樣品。它適用于 N-或 O-聚糖，一旦全甲基化，它們可以通過 MALDI-TOF-MS 或 LC-MS 進(jìn)行分析。
      我們已經(jīng)驗(yàn)證了這項(xiàng)技術(shù)，并證明糖譜分析數(shù)據(jù)是可靠的，可與金標(biāo)準(zhǔn) HILIC UHPLC 方法相媲美。該技術(shù)已用于 Ludger 的一系列高通量研究（使用自動(dòng)全甲基化樣品制備時(shí)間低于 5.5 小時(shí)，可處理 96 個(gè)樣品）。
      聚糖標(biāo)準(zhǔn)品
      Ludger 擁有一系列適用于不同應(yīng)用的系統(tǒng)適用性標(biāo)準(zhǔn)、過程控制和參考標(biāo)準(zhǔn)，包括唾液酸、單糖、聚糖分析和表征的分析。我們提供各種未標(biāo)記的 N-聚糖 (N)、O-聚糖 (O)、寡糖、糖蛋白/糖肽和聚糖文庫標(biāo)準(zhǔn)品。此外，我們的標(biāo)準(zhǔn)品目錄還包括用 2-氨基苯甲酰胺 (2-AB)、2-AA（2-氨基苯甲酸）、普魯卡因酰胺、8-氨基芘-1,3 熒光標(biāo)記的各種 N- 和 O- 聚糖標(biāo)準(zhǔn)品,6-三磺酸 (APTS) 和全甲基化聚糖標(biāo)準(zhǔn)品。我們還提供 Ludger BioQuant 品牌下的定量聚糖和糖肽標(biāo)準(zhǔn)品。
      精心設(shè)計(jì)的分析策略的一個(gè)關(guān)鍵組成部分是包含標(biāo)準(zhǔn)。下面的標(biāo)準(zhǔn)品表顯示了哪些標(biāo)準(zhǔn)品可用于唾液酸、單糖、N-聚糖和/或 O-聚糖分析過程中的最佳實(shí)踐。
      這些分為以下幾類；
      1. 系統(tǒng)適用性標(biāo)準(zhǔn)使分析人員能夠測試分析系統(tǒng)（例如色譜、質(zhì)譜和/或 CE）的整體功能并評(píng)估其是否適合其預(yù)期用途。

      2. 流程標(biāo)準(zhǔn)或流程控制用于驗(yàn)證部分或整個(gè)流程是否正常運(yùn)行。糖分析中的過程標(biāo)準(zhǔn)有四個(gè)主要類別：釋放、標(biāo)記、釋放后標(biāo)記和外切糖苷酶測序

      3. 參考標(biāo)準(zhǔn)允許通過比較來表征。這可以通過將未知物的色譜或電泳保留時(shí)間與結(jié)構(gòu)已*表征的標(biāo)準(zhǔn)物的色譜或電泳保留時(shí)間直接比較來實(shí)現(xiàn)。此外，未知結(jié)構(gòu)的主要分配可以通過將它們的 GU（葡萄糖單位）值（使用葡萄糖均聚物 (GHP) 標(biāo)準(zhǔn)獲得）與 GU 值在數(shù)據(jù)庫或文獻(xiàn)中的聚糖進(jìn)行比較來完成。

      4. 定量聚糖標(biāo)準(zhǔn)品用于確定樣品中分析物的絕對(duì)量。它們還可用于量化流程的效率。

      • N-聚糖命名表

      可用的 N-聚糖存在于大多數(shù)生物和生物制藥糖蛋白中，可分為以下幾類：低聚甘露糖，以及巖藻糖基化、唾液酸化和二、三和四天線的復(fù)合聚糖。聚糖可作為具有游離還原末端（醛醇）或化學(xué)衍生的分子獲得。N-聚糖的常見化學(xué)衍生物是熒光標(biāo)記的糖苷（2-AA、2-AB、APTS、普魯卡因酰胺等）或全甲基化聚糖。
      天然聚糖通常適用于使用帶有熒光標(biāo)簽的還原胺化或進(jìn)行全甲基化或乙基酯化等衍生化的標(biāo)記方法的過程控制。

      A4 家族聚糖

      NA4 聚糖 (A4G4)
      CN-NA4-10U（大?。?0μg）和-20U（大?。?0μg）
      含有末端半乳糖殘基的四觸角 N-聚糖。
      m/z：2370.8566
      產(chǎn)品指南


      NGA4 聚糖 (A4)
      CN-NGA4-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      含有末端 N-乙酰氨基葡糖殘基的四觸角 N-聚糖。
      m/z：1722.6453
      產(chǎn)品指南


      A3 家族聚糖

      A3 聚糖 (A3G3S3)
      CN-A3-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      含有末端唾液酸殘基的三天線 N-聚糖。
      m/z：2879.0106
      產(chǎn)品指南
      NA3 聚糖 (A3G3)
      CN-NA3-10U（大?。?0μg）和-20U（大?。?0μg）
      含有末端半乳糖殘基的三角 N-聚糖。
      m/z：2005.7244
      產(chǎn)品指南
      NGA3 聚糖 (A3)
      CN-NGA3-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      含有末端 N-乙酰氨基葡糖殘基的三觸角 N-聚糖。
      m/z：1519.5659
      產(chǎn)品指南


      A2F 家族聚糖

      A2F 聚糖（FA2G2S2、G2FS2）
      CN-A2F-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      雙天線 N-聚糖，包含末端半乳糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
      m/z：2368.8409
      產(chǎn)品指南
      A1F 聚糖 (FA2G2S1, G2FS1)
      CN-A1F-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      含有末端唾液酸殘基的雙天線 N-聚糖和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
      m/z：2077.7455
      產(chǎn)品指南
      NA2F 聚糖（FA2G2、G2F）
      CN-NA2F-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      雙天線 N-聚糖，包含末端半乳糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
      m/z：1786.6501
      產(chǎn)品指南
      NGA2F 聚糖 (FA2, G0F)
      CN-NGA2F-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      雙天線 N-聚糖，包含末端 N-乙酰氨基葡糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
      m/z：1462.5444
      產(chǎn)品指南
      FA2G1 聚糖 (G1F)
      CN-FA2G1-10U（大?。?0μg）和-20U（大?。?0μg）
      含有一個(gè)末端半乳糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化的雙觸角 N-聚糖。
      m/z：1624.5973
      產(chǎn)品指南


      A2 家族聚糖

      A2 聚糖（A2G2S2、G2S2）
      CN-A2-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      含有末端唾液酸殘基的雙天線 N-聚糖。
      m/z：2222.7830
      產(chǎn)品指南
      A1 聚糖（A2G2S1、G2S1）
      CN-A1-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      含有一個(gè)末端唾液酸殘基的雙天線 N-聚糖。
      m/z：1931.6876
      產(chǎn)品指南
      A2G1 聚糖 (G1)
      CN-A2G1-20U（大?。?0μg）
      含有一個(gè)末端半乳糖殘基的雙天線 N-聚糖。
      m/z：1478.5393
      產(chǎn)品指南
      NA2 聚糖 (A2G2, G2)
      CN-NA2-10U（大?。?0μg）和-20U（大小：20μg）
      含有末端半乳糖殘基的雙天線 N-聚糖。
      m/z：1640.5922
      產(chǎn)品指南
      NGA2 聚糖 (A2, G0)
      CN-NGA2-10U（尺寸：10µg）和-20U（尺寸：20µg）
      含有末端 N-乙酰氨基葡糖殘基的雙天線 N-聚糖。
      m/z：1316.4865
      產(chǎn)品指南


      低聚甘露糖聚糖

      Man-9 聚糖
      CN-MAN9-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      具有 9 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
      m/z：1882.0634
      產(chǎn)品指南
      Man-8 聚糖
      CN-MAN8-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      具有 8 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
      m/z：1720.5919
      產(chǎn)品指南
      Man-7 聚糖
      CN-MAN7-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      具有 7 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
      m/z：1558.5391
      產(chǎn)品指南
      Man-6 聚糖
      CN-MAN6-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      具有 6 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
      m/z：1396.4863
      產(chǎn)品指南
      Man-5 聚糖
      CN-MAN5-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      具有 5 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
      m/z：1234.4334
      產(chǎn)品指南
      M3N2 聚糖 (Man-3)
      CN-M3N2-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）
      具有 3 個(gè)甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
      m/z：910.3278