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      ludger.聚糖分析服務(wù)

       更新時(shí)間:2021-11-22 點(diǎn)擊量:1362




      ludger聚糖分析服務(wù) - 級(jí)別 1

      HILIC 分析

      釋放和熒光標(biāo)記的 N 和 O 聚糖的親水相互作用色譜-(超)高效液相色譜 (HILIC-UHPLC) 是*泛使用的聚糖分析方法之一。每個(gè)聚糖一個(gè)標(biāo)記的化學(xué)計(jì)量連接允許基于熒光和樣品與聚糖標(biāo)準(zhǔn)的直接比較對(duì)不同聚糖種類進(jìn)行相對(duì)定量,從而初步鑒定主要聚糖種類。




      該模塊提供 HILIC-UHPLC N-和/或 O-聚糖譜,以及峰的相對(duì)定量和主要聚糖種類的初步鑒定。分析將對(duì)樣品的單次或三次釋放(通常每次釋放 5-100 µg)、等量(按體積計(jì))的樣品緩沖液陰性對(duì)照、Ludger 陽性和陰性對(duì)照以及系統(tǒng)適用性標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

      該模塊適用于:

      • 初步聚糖分配

      • 質(zhì)量控制 - 配置文件比較以監(jiān)測(cè)已知結(jié)構(gòu)

      • 監(jiān)控批次間的一致性

      • 可比性研究

      為了獲得有關(guān)聚糖結(jié)構(gòu)及其相對(duì)比例的更詳細(xì)信息,需要進(jìn)行2 級(jí)詳細(xì)表征。

      樣品類型:

      • 生物制藥:mAb、糖蛋白激素(例如促卵泡激素 (FSH) 和促紅細(xì)胞生成素 (EPO)、Fc 融合蛋白、疫苗)

      • 細(xì)胞:哺乳動(dòng)物細(xì)胞系、細(xì)菌細(xì)胞成分

      • 生物體液、組織和其他

      • SDS 凝膠中的糖蛋白(僅限 N-聚糖)

      • COVID19 患者樣本(例如血漿、組織)

      • SARS-CoV-2感染的細(xì)胞系

      1 級(jí) HILIC 分析的工作流程

      N-聚糖通過用 PNGAse F 或 PNGAse A 消化從糖蛋白中釋放出來。
      O-聚糖通過肼解或 Orela 試劑從糖蛋白中釋放出來。
      釋放的聚糖用 2-AB 或 2-AA 或普魯卡因胺進(jìn)行熒光標(biāo)記,通過 HILIC-HPLC 或 HILIC-UHPLC 進(jìn)行純化和分析。

      HILIC-HPLC/UHPLC 提供葡萄糖單位 (GU) 值,用于分析糖鏈分離大致基于糖鏈大小的情況,并允許在樣品和標(biāo)準(zhǔn)之間進(jìn)行直接的分析比較。

      報(bào)告

      最終報(bào)告包含:

      • 系統(tǒng)適用性標(biāo)準(zhǔn)和 Ludger 陽性對(duì)照的 HILIC-UHPLC 配置文件

      • 客戶樣品和緩沖液陰性對(duì)照的 HILIC-UHPLC 配置文件

      • 葡萄糖單位 (GU) 值

      • 檢測(cè)峰的相對(duì)比例

      • 調(diào)查結(jié)果摘要

      將客戶樣品中的聚糖與 Ludger 的聚糖標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較,可以初步鑒定主要的聚糖種類



      模塊級(jí)別 1:HILIC 分析具有:

      N-聚糖分析的4 個(gè)選項(xiàng)可供選擇:

      1. G-L1N-HILIC - 選項(xiàng) 1:單個(gè)樣品釋放的糖譜分析+ 配方緩沖液 + Ludger 對(duì)照

      2. G-L1N-HILIC - 選項(xiàng) 2:三份樣品釋放的糖譜分析+ 配方緩沖液 + Ludger 對(duì)照

      3. GX-mAb-LC - 選項(xiàng) 1*:對(duì)多達(dá) 43 個(gè)客戶樣本和 5 個(gè) Ludger 對(duì)照進(jìn)行高通量糖譜分析

      4. GX-mAb-LC - 選項(xiàng) 2*:對(duì)多達(dá) 91 個(gè)客戶樣品和 5 個(gè) Ludger 對(duì)照進(jìn)行高通量糖譜分析

      * 樣品制備方法將在 96 孔格式的 Hamilton STARlet 液體處理機(jī)器人上進(jìn)行。這是并行分析大量樣品的低成本解決方案,提供所有樣品的基本色譜數(shù)據(jù),用于比較目的。

      O-聚糖分析的2 個(gè)選項(xiàng)可供選擇:

      1. G-L1O-HILIC-OHy - 選項(xiàng) 1:對(duì)三份樣品釋放 + 配方緩沖液 + Ludger 對(duì)照進(jìn)行糖譜分析。
        O-聚糖通過肼解釋放。

      2. G-L1N-HILIC-ORe - 選項(xiàng) 2:對(duì)三份樣品釋放 + 配方緩沖液 + Ludger 對(duì)照進(jìn)行糖譜分析
        Orela 釋放 O-聚糖。