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      bellbrooklabs Transcreener cGAMP說明書

       更新時間:2020-12-29 點擊量:2339

      bellbrooklabs Transcreener cGAMP說明書

      bellbrooklabs Transcreener® cGAMP cGAS

       

      bellbrooklabs利用Transcreener cGAMP cGAS分析法發(fā)現(xiàn)cGAS抑制劑

      Transcreener cGAMP cGAS分析法直接測量由環(huán)狀GMP-AMP合酶(cGAS,C6orf150、2'3'-cGAMP合酶)產(chǎn)生的環(huán)狀GMP-AMP  (cGAMP)。通過測量cGAMP的產(chǎn)量,研究人員可以有效地確定 cGAS酶的活性。該測定法提供了一個強大的工具,可以篩選整個化合物庫中的cGAS調(diào)節(jié)劑,以 幫助找到針對cGAS-STING途徑的新療法。

      cGAS是STING途徑中的重要信使

      真核細(xì)胞胞質(zhì)溶膠中DNA的存在是感染或細(xì)胞損傷的指示,并且在I型干擾素(IFN)誘導(dǎo)的驅(qū)動下引發(fā)強烈的免疫反應(yīng)。cGAS是細(xì)胞質(zhì)中雙鏈DNA的非常靈敏的傳感器。DNA的結(jié)合激活了該酶,從而產(chǎn)生了*的環(huán)狀二核苷酸第二信使cGAMP,它充當(dāng)STING(干擾素基因刺激劑)受體的激動劑,從而導(dǎo)致I型干擾素應(yīng)答。

      cGAS STING途徑

      直接檢測cGAMP以測量cGAS酶活性

      Transcreener cGAMP FP分析-了解更多信息
      cGAS分析示意圖FP
       
       

      Transcreener cGAMP cGAS FP檢測技術(shù)手冊(PDF)

       
      cGAMP TR-FRET分析-了解更多
      cGAS分析示意圖TR-FRET
       
       

      應(yīng)用領(lǐng)域

      • 測量cGAS的酶活性
      • 篩選cGAS抑制劑的復(fù)合文庫
      • 量化抑制劑效力
      • 確定抑制劑-cGAS停留時間

      特征

      • 直接檢測未標(biāo)記的cGAMP
      • 易于使用,同質(zhì),一步式
      • 初始速度條件下的穩(wěn)健分析Z'> 0.7
      • 遠(yuǎn)紅色熒光讀數(shù)大程度地減少了化合物干擾
      • 一種安全的非放射性方法
      • 可用于FP或TR-FRET讀數(shù)

      易于使用,混合閱讀,HTS就緒分析

      Transcreener cGAS分析法采用易于HTS使用,混合閱讀的格式。運行您的酶反應(yīng),添加 Transcreener試劑,然后閱讀板。該測定與96、384和1536孔格式兼容。

      在cGAS初始速度下檢測cGAMP

      當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)曲線將原始數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為cGAMP時,該測定法顯示線性。cGAS被雙鏈DNA激活,并需要ATP和GTP底物來生產(chǎn)cGAMP。

      全長人cGAS滴定

      cGAS酶滴定

      線性響應(yīng)

      抑制劑篩選和執(zhí)行SAR

      Transcreener cGAS分析法旨在以高通量格式篩選化合物庫。還可以使用該測定法進(jìn)行隨訪SAR,從而輕松確定抑制劑的效價。

      1600復(fù)合先導(dǎo)篩

      獲取準(zhǔn)確的劑量響應(yīng)測量

      cGAS抑制劑劑量反應(yīng)曲線

      說明了cGAS酶的DNA和底物依賴性

      該測定法準(zhǔn)確地證明了cGAS酶的特征。在GTP和ATP均存在的情況下,雙鏈DNA激活了產(chǎn)生cGAMP的酶。一個45個堿基對的ISD(干擾素刺激性DNA)和一個60個堿基對的HSV(單純皰疹病毒)DNA均可激活該酶。該測定法對cGAMP具有很高的親和力,即使存在其他核苷酸也可以檢測。

      dsDNA激活cGAS酶

      cGAS DNA滴定

      對ATP和GTP的依賴

      依賴于ATP和GTP的cGAS酶

      出色的信號穩(wěn)定性

      該測定顯示24小時以上的信號穩(wěn)定性。這樣的印版穩(wěn)定性對于大型的高通量篩選至關(guān)重要,由于大量樣品需要大量時間才能完成。

      標(biāo)準(zhǔn)曲線包括ATP,GTP,dsDNA和cGAMP的滴定。在每個時間點讀取相同的板。

      cGAS分析信號穩(wěn)定性
       

      cGAS分析服務(wù)

      有興趣推進(jìn)您的程序,但不想內(nèi)部進(jìn)行分析嗎?我們的科學(xué)家可以提供幫助!BellBrook的科學(xué)家將利用其豐富的生物化學(xué)和酶學(xué)專業(yè)知識與您合作,并加快您的cGAS計劃。

      分析開發(fā)服務(wù)

      潛在客戶發(fā)現(xiàn)服務(wù)包括:

      • 抑制劑篩選–識別或確認(rèn)靶標(biāo)的活性。
      • 抑制劑效能分析–靶標(biāo)和/或相關(guān)蛋白的劑量反應(yīng)??焖買C 50結(jié)果。
      • 停留時間測量–使用“跳躍稀釋”酶法測定k off。
      • 作用機理研究–動力學(xué)分析定義了抑制方式。

      聯(lián)系我們以了解更多信息

      請?zhí)顚懴旅娴谋砀?。我們將迅速做出響?yīng),以使對話進(jìn)展順利,并了解我們?nèi)绾翁峁椭?。我們保持事情分散,保密和專業(yè)。

       
       

      在主要的多模閱讀器上驗證了遠(yuǎn)紅FP和TR-FRET讀數(shù)

      供應(yīng)商儀器
      bioteklogoTriStar²SLB 942
      密特拉拉斯LB 943
       
      bioteklogoCytation™5
      Cytation™3
      Cytation™1
      Synergy™H1
      Synergy™2 / H4 / 4
      Synergy™HTX
      Synergy™Neo 2
       
      BMGLABTECH徽標(biāo)POLARstar ®歐米茄
      FLUOSTAR ®歐米茄
      PHERAstar ® FSX
      PHERAstar ®加/ FS
      CLARIOstar ® /加
       
      MDS AT徽標(biāo)分析師® GT / HT
      雙子座® XPS / EM
      的SpectraMax ® M2 / M2e的
      的SpectraMax ® M5 /的M5e / FlexStation ® 3
      的SpectraMax ®范式
       
      珀金埃爾默標(biāo)志的EnVision ® /的EnVision ® XCITE
       
      tecanLogo無限® M1000 / M1000Pro / Safire2™
      無限® M200
      無限® F500
      無限® F200 /超進(jìn)化
      Spark™10M

      包含什么

       
      零件筆記
      cGAMP抗體對二核苷酸cGAMP具有特異性的抗體。
      示蹤劑當(dāng)被置換時,取決于測定形式,可以在FP或TR-FRET中讀取熒光的變化。
      停止并檢測緩沖區(qū)B,10X可以用于終止酶反應(yīng)以終止終點讀數(shù)的緩沖液。
      三磷酸腺苷ATP可用于酶反應(yīng)和標(biāo)準(zhǔn)曲線。
      GTPGTP可用于酶反應(yīng)和標(biāo)準(zhǔn)曲線。
      cGAMPcGAMP可用于創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。
      干擾素刺激DNAISD是用于激活cGAS酶的45 bp寡聚體。

      您將需要什么

       
      零件筆記
      cGAS酶您可以直接通過BellBrook Labs購買活性cGAS酶 。
      酶緩沖液我們經(jīng)常使用含有20mM TRIS(pH 7.5)中,5毫摩爾MgCl酶緩沖液2,0.01%的Brij-35和1%DMSO(測試化合物溶劑)。使用適合您的酶條件的緩沖液
      檢測板您可以直接通過BellBrook Labs購買測定板。

       

      FP-需要一個具有非粘合表面的全黑色印版。我們建議康寧384孔板,目錄 #4514。

      TR-FRET-需要具有無粘合表面的全白色板。我們建議使用康寧384孔板Cat。#4513

       

      Transcreener cGAMP cGAS分析試劑盒

      *

       
      貨號。產(chǎn)品描述價錢
      3024-1KTranscreener cGAMP cGAS FP測定法(1,000測定法,384孔)$ 798.00
      3024-10KTranscreener cGAMP cGAS FP測定法(10,000測定法,384孔)$ 4,615.00
      3024-100KTranscreener cGAMP cGAS FP測定(10 X 10,000測定,384孔)$ 23,075.00
      3025-1KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET測定(1,000測定,384孔)$ 875.00
      3025-10KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET測定(10,000測定,384孔)$ 4,989.00
      3025-100KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET測定(10 X 10,000測定,384孔)$ 24,950.00
       

      cGAS酶訂購信息

       

       
      貨號。產(chǎn)品描述價錢
      2227重組cGAS酶,活性的,人的,全長,10 µg$ 399.00
      2228重組cGAS酶,活性的,人的,全長,100 µg$ 1,398.00
       
       

      cGAS篩選套件

      *當(dāng)以1.75μg/ mL(30 nM)使用時,包括用于各孔的足夠酶

       
      貓。沒有。產(chǎn)品描述價錢
      3024-1K-B包括Transcreener cGAS FP Assay 1K試劑盒和20 µg人類cGAS酶$ 1,275.00
      3024-10K-B包括Transcreener cGAS FP Assay 10K試劑盒和200 µg人類cGAS酶$ 6,670.00
      3025-1K-B包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 1K試劑盒和20 µg人類cGAS酶$ 1,345.00
      3025-10K-B包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K試劑盒和200 µg人類cGAS酶$ 6,995.00
       

      FP檢測板

       

      貨號。產(chǎn)品描述價錢
      2233康寧96孔黑色檢測板(#3686),3片裝(200+檢測)$ 40.00
      2229康寧384孔黑色檢測板(#4514),3包(1,000多種檢測)$ 45.00
      2230康寧384孔黑色檢測板(#4514),30包(10,000+檢測)$ 400.00

       

      TR-FRET檢測板


      貨號。產(chǎn)品描述價錢
      2234康寧96孔白色檢測板(#3642),3包(200多種檢測)$ 40.00
      2231康寧384孔白色檢測板(#4513),3包(1,000多種檢測)$ 50.00
      2232康寧384孔白色檢測板(#4513),30包(10,000+檢測)$ 450.00