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      技術(shù)文章
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      AptaFluor®SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測定

       更新時間:2020-12-29 點擊量:1835

       

       

       

      HMT的同質(zhì)通用酶甲基轉(zhuǎn)移酶測定

      AptaFluor –利用適體的力量進(jìn)行藥物發(fā)現(xiàn)

      表觀遺傳調(diào)控已被證明是多種疾病的成因。甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的發(fā)現(xiàn)目前是一個活躍的領(lǐng)域。甲基轉(zhuǎn)移酶使用S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作為甲基供體甲基化各種底物,剩下的常見產(chǎn)物S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)。

      AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測定法使用天然存在的適體或核糖開關(guān),可選擇性地與SAH(甲基轉(zhuǎn)移酶反應(yīng)的不變產(chǎn)物)結(jié)合。核糖開關(guān)的*親和力和選擇性與陽性TR-FRET信號相結(jié)合,能夠以的靈敏度篩選和分析甲基轉(zhuǎn)移酶。

      通過直接檢測均質(zhì)形式的SAH,實際上可以使用任何甲基轉(zhuǎn)移酶進(jìn)行篩選和酶研究。該分析可用作協(xié)助研究人員進(jìn)行命中鑒定和鑒定的工具,以尋求開發(fā)新的甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑作為疾病的治療方法。

      通過TR-FRET讀數(shù)直接檢測SAH

       

      超敏感

      敏感的HTS甲基轉(zhuǎn)移酶測定法的LLD為0.6 nM SAH。這大大減少了酶的使用,并允許在 SAM的K m或以下進(jìn)行分析。

       

      比較此海報中不同方法的測定靈敏度

      生理SAM和AptaFluor分析法靈敏檢測PRMT4

      穩(wěn)定

      出色的試劑和信號穩(wěn)定性降低了測定的可變性,并實現(xiàn)了自動化的工作流程。

       
       

      強(qiáng)大的

      在各種測定條件下均具有出色的Z'值。

       

      具有0.2 uM或2 uM SAM和組蛋白底物的PRMT4酶為陽性對照。PRMT4和組蛋白底物作為陰性對照。

      簡單的混合閱讀

      AptaFluor是一種簡單的混合和讀取格式。運(yùn)行您的酶反應(yīng),添加淬滅試劑,添加AptaFluor試劑,并閱讀板。

       

      與多種MTase受體底物兼容

       

      MT受體底物的耐受性。在存在核小體(10 ng /μL),組蛋白H3-3(3 ng /μL),組蛋白H3(1-21)肽(10μM)和Poly d(IC)的情況下建立100 nM SAH-SAM標(biāo)準(zhǔn)曲線)(2.5毫安/微升); 控制孔缺少M(fèi)T底物。

      通用測定法–與幾乎所有甲基轉(zhuǎn)移酶一起使用

       
      甲基轉(zhuǎn)移酶和底物圖
       

      AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測定– TR-FRET(PDF)

      在主要的多模式閱讀器上驗證的遠(yuǎn)紅色TR-FRET讀數(shù)

      供應(yīng)商儀器
      bioteklogoTriStar²SLB 942
      密特拉拉斯LB 943
       
      bioteklogoCytation™5
      Cytation™3
      Cytation™1
      Synergy™H1
      Synergy™2 / H4 / 4
      Synergy™HTX
      Synergy™Neo 2
       
      BMGLABTECH徽標(biāo)POLARstar ®歐米茄
      FLUOSTAR ®歐米茄
      PHERAstar ® FSX
      PHERAstar ®加/ FS
      CLARIOstar ® /加
       
      MDS AT徽標(biāo)分析師® GT / HT
      雙子座® XPS / EM
      的SpectraMax ® M2 / M2e的
      的SpectraMax ® M5 /的M5e / FlexStation ® 3
      的SpectraMax ®范式
       
      珀金埃爾默標(biāo)志的EnVision ® /的EnVision ® XCITE
       
      tecanLogo無限® M1000 / M1000Pro / Safire2™
      無限® M200
      無限® F500
      無限® F200 /超進(jìn)化
      Spark™10M

      AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒

      *對于定制或批量訂單(超過10,000口井),請聯(lián)系我們(info@bellbrooklabs.com)以獲得報價。

       

      貨號。產(chǎn)品描述價錢
      3023-BAptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測定(100個測定,96孔)$ 375.00
      3023-1KAptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測定法(1,000測定法,384孔)$ 1,175.00
      3023-10KAptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測定(10,000測定,384孔)$ 6,999.00

       

      TR-FRET檢測板

      編輯
      貓。沒有。產(chǎn)品描述價錢 
      2234康寧96孔白色檢測板(#3642),3包(200多種檢測)$ 40.00添加到購物車
      2231康寧384孔白色檢測板(#4513),3包(1,000多種檢測)$ 50.00添加到購物車
      2232康寧384孔白色檢測板(#4513),30包(10,000+檢測)$ 450.00添加到購物車
       

      使用生化分析進(jìn)行篩選后導(dǎo)航命中優(yōu)先級的指南

      這樣就完成了屏幕顯示。下一步是什么?本指南的重點是在使用酶標(biāo)靶進(jìn)行初次篩選后,無論使用高通量篩選(HTS)還是虛擬篩選(VS),如何使用生化分析來表征化合物并確定其優(yōu)先級。下面顯示了一個典型的篩選漏斗,突出了生化活性測定法的許多應(yīng)用。

      在這里,我們討論選擇潛在客戶的策略,包括:

      • 分析注意事項
      • 命中確認(rèn)
      • 運(yùn)行劑量響應(yīng)
      • 復(fù)合分類
      • 命中擴(kuò)展
      • 行動研究機(jī)制
      • 停留時間測量